تحضير أربع بُنى مأشوبة باستعمال حامل pLEXSY والجين المُرمزة لعامل النمو الشبيه بالإنسولين من النمط الأول IGF-I

الملخص

يضبط عامل النمو الشبيه بالأنسولين من النمط الأول IGF1، وهو بروتين صغير ينتجه الكبد، حادثات خلوية عديدة تضمن النمو الصحيح لأعضاء الجسم وللجسم بشكل عام. تتنوع الأعراض الناتجة عن عوز هذا البروتين بدءاً من اضطرابات النمو حتى القزامة. وتعالج جميع هذه الأعراض معالجة معاوضة عن طريق اعطاء المرضى للشكل المأشوب من IGF1 والذي ينتج عادة باستعمال البكتيريا. رغم الاستعمال الواسع لأنظمة الإنتاج البروتينية المعتمدة على البكتريا إلى أن لها العديد من المساوئ. يتغلب نظام جديد لإنتاج البروتينات المأشوبة على معظم هذه المساوئ وهو نظام LEXSY الذي يعتمد على استعمال الليشمانيا بدل البكتريا لإنتاج البروتينات. تتميز الليشمانيا بإنتاج بروتينات بأشكالها المماثلة للأشكال الطبيعية من خلال قدرتها على الطي الصحيح للبروتين وعلى انجازها لتعديلات بعد الترجمة. تم في هذا العمل استعمال الحامل pLEXSY لتنسيل الجين المُرمزة للـِ IGF1 البشري بشكلين إما وحده أو مدمجاً مع البروتين المتألق الأخضر GFP، وبطريقتين تضمن الأولى إنتاجه ضمن الخلايا بينما تضمن الثانية إفرازه إلى وسط الزرع. تعد هذه هي المرة الأولى التي تنتج فيها هذه البنى بهدف إنتاج البروتين بشكل مؤشب في نظام جديد يتجاوز صعوبات إنتاجه في البكتريا.