الحيوية الكيميائية للقطيرات اللبيدية الكبدية في فئران BALB/c إثر تعرضها لمركب الديوكسين

الملخص

تُعرف الديوكسينات بأنها سموم عضوية هالوجينية مثابرة وعالية السُّمية وتشمل عائلتين هما الديوكسينات ثنائية البنزن عديدة التكلور Polychlorinated Dibenzo-p-Dioxins (PCDDs) والفورانات ثنائية البنزن عديدة التكلور Polychlorinated Dibenzo Furans (PCDFs). ويتواسط المستقبل Aryl-hydrocarbon Receptor (AhR) سُميِة الديوكسينات، ويُعرف المركب 2,3,7,8 رباعي كلورو ثنائي بنزو بارا ديوكسين 2,3,7,8,-tetrachlorodibenzo-p-dioxin (TCDD) بأنه الأعلى سُميِّة من بين جميع الديوكسينات والأعلى ألفة للمستقبل AhR وذو عامل مُكافئ سُمِّي يعادل 1.0.. ونظراً لطبيعتها المُحبة للدسم، تُعرف الديوكسينات بقدرتها على التراكم في النسج المدخرة للدسم وبشكل خاص الكبد الذي يلعب دوراً رئيساً في نزع سُميِّة الديوكسينات بما يمتلكه من منظومة إنزيمية معقدة؛ عائلة السيتوكرومات P450 (CYPs)، وعُضيات متخصصة هي القطيرات اللبيدية Lipid Droplets (LDs). وهنا تبرز أهمية تحري أثر التعرض لِـTCDD على LDs الكبدية مورفولوجياً وجزيئياً لدى نموذج حيواني كفئران BALB/c. فقد تم في هذا العمل تجريع إناث فئران BALB/c فموياً بجرعة واحدة من زيت الذرة الحاوي على 15 ميكروغرام/كيلوغرام من TCDD، بالمقارنة مع الفئران الشاهدة المُجرّعة فموياً بزيت الذرة فقط. ووفق أربع فواصل زمنية من زمن التجريع، عُزلت LDs الكبدية ووُصفت مجهرياً. ودُرس التغير النسبي في التعبير المورثي عن أهم المورثات المسؤولة عن نزع السُميّة واصطناع الأوكسيلبينات وLDs باستعمال تقانة التفاعل السلسلي للبوليميراز الكمي في الزمن الحقيقي RT-qPCR، أظهرت النتائج وجود فروقات في التعبير المورثي في العينات المدروسة باختلاف النقاط الزمنية للدراسة، وتبدو الفروقات جليّة في عينات الزمن P3 وP4 إذ توجد زيادة في التعبير المورثي في كل من مورثتي AhR وARNT وCYP1A1 وذلك بالمقارنة مع P1 وP2. وتُظهر أيضاً زيادة واضحة في التعبير المورثي لكلٍ من مورثتي LOX15 وCOX2، وكذلك ارتفاعاً في التعبير عن مورثات Plin5 وCideC وPpara وPparg. وعلى خلاف ذلك، لُوحظ انخفاضاَ في التعبير المورثي للمورثات المدروسة عدا AhR، في الزمن P1، أما في الزمن P2 فلُوحظ انخفاضاً في التعبير المورثي في كلا مورثتي AhR وARNT، وعلى العكس ارتفاعاً طفيفاً في CYP1A1، وعدم وجود فروقات تُذكر في باقي المورثات. أما على مستوى LDs، فقد تمَّ التأكد من نقاوتها وسلامة شكلها مجهرياً، وكذلك تلوينها بصبغة Blue Nile وتصويرها باستعمال مجهر الفلورة. لُوحظ ارتفاع بسيط في أعداد LDs وتراكيز البروتينات المرتبطة في كل من النقاط الزمنية الأربعة بالمقارنة مع الشاهد، إلا أنه لم يكن هناك اختلافات ملحوظة بحجم LDs، إذ كانت أحجامها متقاربة في جميع عينات الدراسة. تخلص نتائج دراستنا لوجود مؤشرات أولية للتعرض لِـ TCDD على مستوى التعبير المورثي لمورثات مسؤولة عن نزع السُّميِّة واصطناع الأوكسيلبينات وLDs بشكل معتمد على الزمن. وهنا تبدو أهمية التركيز على سُمية هذا المركب وقدرته على التراكم ضمن LDs وتأثيره على تعدادها وعلى تركيبها ومحتواها اللبيدي والبروتيني من خلال تعديل منظومة التعبير المورثي، الأمر الذي يتطلب مزيداً من البحث.